尊龙凯时在生物医疗领域中强调了细胞系和细胞株的概念与特点。

一、细胞系与细胞株的定义

1. 细胞系（Cell Line）：当原代培养经过首次传代成功后，即形成细胞系，细胞系由原代培养中存在的细胞世系（Lineage of Cells）构成。

2. 细胞株（Cell Strain）：通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得具有特殊特性或标志物的细胞，被称为细胞株。这些特性或标志必须在整个培养期间内保持不变。细胞株可分为有限细胞株（finite cell strain）与连续细胞株（continuous cell strain），前者不能持续传代，而后者能够连续传代。针对人类肿瘤细胞，若在体外培养超过六个月且生长稳定，即可称为连续性株或系。

二、建立细胞系（或株）的要求

建立何种体外培养群体被认可为已鉴定的细胞，视具体情况而定，没有统一标准。对原代培养的细胞要求供体均一，取材部位及组织种类等条件稳定。对于长期培养或反复传代的细胞，通常需提供以下信息：

1. 组织来源：包括细胞供体所属物种（人类或动物）、性别、年龄及取材的器官或组织。如果取材自肿瘤组织，需要提供临床和病理诊断信息，以及病历号等。

2. 细胞生物学检测：了解细胞的一般及特殊生物学特性，如细胞形态、特异性结构、增殖曲线、分裂指数和倍增时间等。如果是肿瘤细胞，则需通过各种实验（如软琼脂培养、异体接种致瘤等）来验证其来源及维持恶性特性。

3. 培养条件和方法：应说明细胞系（或株）的适应生存环境，包括使用的培养基、血清种类、用量及适宜的pH值。

三、细胞建株的关键要点与基本流程

(一) 肿瘤细胞培养技术要点

1. 取材：材料主要来自外科手术或活检肿瘤组织，需避免使用坏死组织，选择活性较好的肿瘤细胞部位。取材后应尽快培养，若无法立即培养可进行冻存。

2. 成纤维细胞排除：肿瘤组织中常混有成纤维细胞，这些细胞可能与肿瘤细胞共同生长并抑制癌细胞。因此需要通过机械刮除、反复贴壁、消化排除或胶原酶消化等方法来排除成纤维细胞。

3. 提高肿瘤细胞的存活率与生长率：建立可传代的肿瘤细胞系非常困难，因此需采取特殊措施，例如使用适宜的底物（如鼠尾胶原底层）、细胞生长因子（如胰岛素、氢化可的松、雌激素等）以及考虑动物媒介培养。

(二) 人类淋巴母细胞建株的步骤

1. 在离心管中加入4ml肝素抗凝血及2ml RPMI 1640。

2. 混匀后，缓慢沿管壁加入到预置有4ml淋巴细胞分离液的上层，静置30分钟。

3. 以1500 rpm离心15分钟，吸取白细胞层（第二层）到另一离心管中。

4. 加5ml RPMI 1640洗涤白细胞两次。

5. 将白细胞接种至1ml RPMI 1640培养基中，加入10μl环胞霉素和100μl EBV液，混匀。

6. 在37℃水浴摇床上搅拌40次/分钟，持续3小时。

7. 以1500 rpm离心15分钟，将细胞接种至含1mM谷氨酰胺的培养基中，并加入10μl环胞霉素，温育于37℃。

8. 观察细胞转化和生长情况，决定是否进行半量换液，通常进行1-2次，并保持环胞霉素的浓度。

9. 待转化细胞数量明显增加，并出现细胞团块后，可转入25ml细胞培养瓶，加1-2ml培养基，并在37℃培养10-15天。每隔3-4天观察一次，决定何时换液和传代。

10. 当细胞生长达到一定数量后进行冻存，冻存前应进行核型分析和存档。

通过使用尊龙凯时的先进技术与方法，生物医学领域在细胞培养和细胞系建立方面取得了显著进展，推动了研究和治疗的不断发展。