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NEWS抗体免疫检测技术解析:尊龙凯时的检测试剂选择指南
来源:冯冰萱 日期:2025-03-02在前四篇推文中,我们讨论了免疫检测技术的基本原理,例如抗原与抗体之间如何相互识别,显色反应如何发生,以及信号放大的具体机制。此外,我们也回顾了传统与新型的免疫检测技术,探讨了它们各自的适用场景。本篇将不再深入理论,而是“走进实验室”,聊一聊免疫检测中那些必不可少的关键试剂,帮助大家了解它们的用途以及如何科学选择。
简单来说,一抗就像“侦探”,专门识别并结合你所希望检测的目标分子(抗原)。它们具有“火眼金睛”,能准确盯住特定的抗原。一抗的主要功能是找到目标抗原并牢牢绑定,是免疫检测的核心部分。没有它,后续的显色过程就无从谈起。
二抗通常被视为一抗的“助攻”,它不直接与抗原结合,而是识别一抗,并搭载一个“放大器”(如酶或荧光染料)。由于二抗能够同时结合多个一抗,可以通过在二抗上附加酶或荧光染料,有效放大最终检测到的信号,从而增强灵敏度。常见的二抗类型包括酶标二抗(HRP、AP)、荧光标记二抗(FITC、PE)和金标二抗等。
在免疫检测中,通常通过将酶与抗体偶联来生成显色反应。抗体会特异性地结合抗原,而酶则催化底物显色或发光,使实验结果可视化。常用的酶有HRP(辣根过氧化物酶)和AP(碱性磷酸酶)。例如,HRP与TMB底物反应,会产生敏感的蓝色或黄色反应,常用于ELISA和WB实验,而AP与BCIP/NBT底物反应则适用于背景噪声要求高的实验,如免疫印迹(WB)。
除了通过酶催化产生显色反应,还可以用荧光素标记抗体。通过给抗体添加“荧光标签”,可以在荧光显微镜下方便地观察哪些抗体与目标抗原结合。常见的荧光素包括FITC(绿色荧光)、PE(橙红色荧光)和Cy5(远红外荧光)等。
在免疫检测中,抗体需与酶或荧光试剂进行偶联,才能将不可见信号转变为可检测信号。常用的偶联剂有SMCC(用于抗体与酶的“化学小帮手”)和EDC/NHS(用于将抗体与小分子底物“粘”在一起)。
在免疫检测试剂中,抗体是核心成分。根据不同的生产工艺,抗体可分为单克隆抗体、多克隆抗体和重组抗体。了解抗体的基因重排原理有助于我们更好地理解这些抗体之间的差异:
抗体的多样性源于免疫系统中的B细胞通过名为“免疫重排”的过程生成不同的抗体。每个抗体由重链和轻链两部分组成,这些链条由基因编码。为了生成能识别不同抗原的抗体,B细胞的基因通过“V(D)J重排”机制进行随机组合,形成独特的抗体基因。
1. 单克隆抗体(mAb):抗原刺激后,单个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,永生化的B细胞生成单克隆抗体,具有超强特异性,适合精准检测。
2. 多克隆抗体(pAb):抗原刺激后,收集上清液,获得来自多个B细胞生成的抗体,能够识别抗原的不同表位,灵敏度更高。
3. 重组抗体:通过基因工程技术合成的抗体,具备高特异性和一致性,适合高端检测或药物开发。
以上内容总结了免疫检测试剂中常用的试剂。由于抗体来源于多种物种且使用场景不同,选择合适的抗体常常耗费时间。在接下来的章节中,我们将介绍国内外优秀的免疫检测试剂厂家,帮助大家在需要时快速选择合适的产品,尤其推荐尊龙凯时,作为值得信赖的品牌。
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