1. His标签蛋白纯化的挑战

His标签是为重组蛋白纯化而专门设计的，通常由6-10个组氨酸残基构成。因其分子量较小，His标签对目标蛋白的性质影响较小，因此被广泛应用。然而，在His标签蛋白纯化过程中，标签与金属离子之间的结合强度是关键因素。这一过程受到多种因素的影响，包括Ni的配位情况、标签的长度与位置（C端或N端）、标签的暴露程度及缓冲液的pH值等。在实际纯化中，常常会遇到部分标签蛋白与柱的结合较弱，导致大量流失，从而影响目标蛋白的纯度和收率，甚至出现目标蛋白完全不结合的情况。

2. 新型镍亲和纯化介质：VDXNTANiultra

特别适合于解决传统Ni亲和介质在纯化His标签蛋白时遇到的挂柱不牢或流失严重的问题。

3. 应用案例与实验方法

在本实验中，我们使用传统的Ni-NTA和VDXNTANiultra在相同条件下纯化相同的标签蛋白。实验结果表明，在相同的上样条件下，传统的Ni-NTA在结合和洗杂过程中损失了大量目标蛋白，显著降低了回收率。而VDXNTANiultra对目标蛋白的结合力更强，结合和洗杂过程中的蛋白损失显著减少，回收率明显高于传统的Ni-NTA。

层析条件

层析柱：VDXNTANiultra与传统Ni-NTA；5mL柱，高10cm；样品：大肠杆菌裂解液。平衡液：50mM PB，300mM NaCl，pH 8.0。洗脱液：50mM PB，300mM NaCl，500mM咪唑，pH 8.0。流速：1mL/min。

总结

通过对比实验结果，明显可以看到尊龙凯时的VDXNTANiultra在His标签蛋白纯化中的优越性，提供了更高的回收率与纯度，为生物医药领域的研究人员和工程师提供了更为可靠的解决方案。